動物血清廠家告訴您樣本的用途

2022/11/28 10:53


動物血清:將收集在血清分離管中的全血標本放置在室溫下.5-2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20分鐘,取上清,或將上清除-20℃或-80℃但要避免反復凍融。

血漿:用EDTA或者肝素作為抗凝劑采集標本,采集后30分鐘內2-8℃1000×g離心15分鐘,取上清檢測,或將上清放在-20℃或-80℃但要避免反復凍融。

組織勻漿:預冷PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(均勻漿液中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后切割組織。切割組織與相應體積PBS(一般按1:9的重量體積比,如1g組織樣品對應9mL的PBS,可根據實驗需要適當調整具體體積并做好記錄。PBS加入蛋白酶抑制劑入蛋白酶抑制劑),在冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,均勻漿可以超聲破碎或反復凍融。最后,將均勻漿液加入5萬×g離心5~10分鐘,取上清檢測,或將上清放在-20分鐘℃或-80℃但要避免反復凍融。

細胞裂解液:吸棄培養液PBS(0.01M,pH7.4)再次清洗細胞。用細胞刮去細胞(胰酶和胰酶不能使用)EDTA處理),加2-5mLPBS(0.01M,pH7.4)。懸浮細胞可以省略。收集細胞懸液,4℃1000×g離心10min,棄去培養基,用預冷PBS潤洗3次。加入適量的預冷PBS或非變性細胞裂解液(臨用前添加蛋白酶抑制劑)重懸細胞,通常6孔板一孔的細胞量需要150-250μLPBS重懸。將樣品放入-20℃或-80℃,冷凍樣品,然后在室溫下解凍樣品,反復冷凍3次,使細胞完全分解,或超聲破碎樣品,以達到裂解的目的?!?0000×g離心10min,去除細胞碎片,取上清檢測,或將上清放在-20℃或-80℃但要避免反復凍融。

上清細胞培養物或其他生物標本,請1萬×g離心20分鐘,取上清檢測,或將上清放在-20℃或-80℃但要避免反復凍融。

樣品的保存和穩定性:

樣本在2-8℃72h,在-20℃或-80℃可儲存6個月以上。樣品收集后,不是一次檢測,請按一次用量分裝冷凍,避免反復冷凍。

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